扫描电镜样品制备步骤 (如何做)

扫描电子显微镜(扫描电镜)是一种强大的分析技术，允许在高分辨率下对各种材料进行成像。为了获得高质量的扫描电镜图像，需要对样品进行适当的制备。制备过程包括样品采集、固定、脱水、临界点干燥、涂导电材料等几个步骤。在本文中，我们将详细讨论每一个步骤，并为制备扫描电镜分析样品提供一步一步的指导。

样品收集

扫描电镜样品制备的第一步是采集样品。样品可以是任何感兴趣的材料，比如生物组织、金属、聚合物或矿物。在采集过程中小心处理样品，以避免损坏或污染是很重要的。例如，采集生物组织时应采用无菌技术，以防止细菌或真菌污染。金属和其他硬材料应使用金刚石锯或其他适当的切削工具切割，以获得一个可以安装扫描电镜分析的平面。

固定

样品采集完成后，需要对其进行固定，以保存其结构，并防止后续处理步骤中可能发生的任何变化。固定可以使用各种化学试剂来完成，包括甲醛、戊二醛或多聚甲醛。固定剂的选择取决于被分析样品的类型和下游应用。例如，戊二醛通常用于保存生物组织，而多聚甲醛更适合保存植物组织。

脱水

扫描电镜样品制备的下一步是脱水。这一步去除样品中的所有水分，这对于防止成像过程中可能引入的任何伪影是必要的。脱水通常是通过将样品置于一系列分级乙醇溶液中来实现的，从低浓度(例如30%)开始，逐渐增加到100%。样品通常在每个溶液中停留几分钟到几个小时，时间取决于样品的大小和类型。

临界点干燥

样品脱水后需要干燥，以防止扫描电镜分析过程中水蒸气凝结在样品上。临界点干燥(CPD)是一种常用的样品干燥技术。该技术是将样品置于有超临界流体(如CO2)的腔室中，用超临界流体去除样品中剩余的水分。然后，将样品慢慢带到流体的临界点，此时流体变成气体，样品被干燥。CPD是一种温和的干燥技术，保留了样品的结构，适用于广泛的材料。

涂层

扫描电镜样品制备的最后一步是在样品表面涂覆导电材料。这一步骤是必要的，以防止样品在扫描电镜成像过程中充电，这可能导致图像质量较差。可以使用的涂层有几种类型，包括金、铂、钯或碳。金和铂涂层通常用于生物样品的高分辨率成像，而碳涂层更适合于金属或矿物等硬质材料的成像。该涂层可以使用溅射或蒸发技术，将一层导电材料薄层沉积在样品表面。

扫描电镜样品制备的步骤说明

1. 使用适当的技术和工具收集样品。

2. 使用适合所分析样品类型的固定剂固定样品。

3. 将样品置于一系列分级乙醇溶液中，从低浓度开始，逐渐增加到100%，从而使样品脱水。

4. 进行临界点干燥，去除样品中所有剩余的水分。

5. 使用适当的涂层技术在样品上涂上导电材料。